#
用户登录
用 户 名 :
密 码:
找回密码 是否下次登录
用户注册
* 用户名
* 密   码
* 确认密码
* 姓   名
性   别
出生日期
* 邮   箱
* 联系电话
* 公司名称
职位
* 通讯地址
找回密码#
用 户 名 :
邮箱:
首页>技术与应用>应用数据库

肉及肉制品中瘦肉精的测定

发布时间:2014-12-31        内容来源:月旭科技

1、适用范围
    适用于肉及肉制品中瘦肉精的检测。

2、提取步骤
    称取2g已捣碎的样品于50ml离心管中,加入8ml乙酸钠缓冲液,充分混匀,再加50µLβ-葡萄糖醛甙酶/芳基硫酸酯酶,混匀后,37度环境下酶解12h。添加100µL的10ng/mL内标工作液于待测样品中, 加盖置于水平振荡器上振荡15min,离心10min(5000r/min ),取4mL上清液加高氯酸调节pH值到1土0.3。
5000r/min离心10min后,将全部上清夜转移到50ml的离心管中,用10mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值到11。加入10mL饱和氯化钠溶液和10ml异丙醇-乙酸乙酯(6/4)混合溶液,充分提取,在5000r/min下离心10min。转移全部有机相,在40水浴下用氮气将其吹干。加入5mL乙酸钠缓冲液,超声混匀,使残渣充分溶解后备用。将阳离子交换固相萃取小柱连接到真空过柱装置,然后将上述残渣溶液上柱,依次用5mL水、5mL的2%甲酸水溶液和5mL甲醇洗涤柱子并彻底抽干,最后用5mL的5%氨水甲醇溶液洗脱柱子上的待测成分。洗脱液在40水浴下氮气吹干。准确加入1ml的0.1%甲酸/水-甲醇溶液(95/5),超声混匀。用0.22微孔滤膜过滤,上LC-MS/MS进行分析。

3、SPE净化步骤净化
SPE柱:Welchrom® P-SCX,60mg/3mL
a 活化:依次加入5mL 甲醇和5mL水,流出液弃去;
b 上样:将提取液加入Welchrom® P-SCX柱中,流出液弃去;
c 淋洗:依次用5mL水,5mL 2%甲酸水溶液和5mL甲醇淋洗,淋洗液弃去;
d 洗脱:6mL 5%氨水甲醇溶液洗脱,收集洗脱液;
e 重新溶解:50ºC下氮气吹干洗脱液,准确定容至1mL后用LC-MS/MS进行分析。

4、a 色谱条件
色谱柱:Ultimate® XB-C18,1.8µm,100mm×2.1mm
流动相:0.1%甲酸水溶液+0.1%甲酸乙腈溶液,梯度洗脱  
流速:  0.25ml/min
进样量:5μL
柱  温:30ºC

b 质谱条件
离 子 源:ESI+ 
离子喷雾电压:3.0kV 
脱溶剂气:氮气,流速500L/h 温度400
碰撞气:Ar 0.27ml/min
分辨率:Q1(单位)Q3(单位)
扫描模式:MRM 定性离子对277.3>203.1;277.3>259.3
定量离子对(m/z)277.3>203.1

5.谱图或者加标回收率结果

                                  表1:加标回收率测定结果 

沪ICP备05030427号      Copyright© 2013 月旭科技(上海)股份有限公司     Designed by Wanhu

月旭论坛